超音波細胞破砕機を使用した細胞断片化によるクロロフィル抽出の具体的な手順
Feb 20, 2024
超音波細胞破砕機は、液体中での超音波の分散効果を利用してキャビテーションを発生させ、それによって液体中の固体粒子や細胞組織を破壊します。
生物産業の発展により、サンプル温度の測定と制御、低温冷却サンプルと機械全体の知能レベルの向上など、超音波細胞粉砕機を使用する実験の要件が高まっています。
超音波細胞破砕機を使用した超音波細胞破砕によるクロロフィル抽出の具体的な手順は次のとおりです。
1. サンプル水を遠心分離または濾過し、サクションフィルターにアセテート繊維濾過膜を取り付けます。 濾過のために定量的な水サンプルを注ぎ、濾過中の負圧が高すぎないようにします(約 50kPa)。 水サンプルを採取した後、フィルター膜上の水分を減らすために 1-2 分間吸引を続けます。 1-2 日間の短期保存が必要な場合は、通常の冷蔵庫で冷凍保存できます。 長期保存(30日間)が必要な場合は、低温冷蔵庫(-20度)で保存してください。
2. 植物プランクトンを含むフィルター膜を取り出し、冷蔵庫で 6-8 時間低温乾燥します。 ハサミで小さく切り、5mlまたは10mlの遠沈管に入れます。 90% アセトン 3-4 ml を加えて破片を液面より下に浸します。 破片を超音波容器に入れ、超音波を使用してサンプルの細胞を破壊します。 (* 統一メソッドの断片化時間と頻度の特定を容易にするために、異なる時間と頻度での実験を比較します)。
3. 超音波による細胞断片化を行ったサンプルを遠心分離機(3000-4000r/min)で 10 分間遠心分離します。 上清を 5ml または 10ml メスフラスコに注ぎます。 90% アセトンで 5ml または 10ml に希釈し、よく振ります。
4. 上清を分光光度計に置き、1cm 光路比色皿を使用して、それぞれ 750nm、663nm、645nm、および 630nm の波長での吸光度値を読み取ります。 サンプルの吸光度を補正するには、ブランク吸光度測定として 90% アセトンを使用します。
